Human Glioblastoma Organoid Kit

人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官培養(yǎng)基套裝

1、 產(chǎn)品描述

人膠質(zhì)瘤是一種起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的腦腫瘤，使用類(lèi)器官技術(shù)可以幫助研究人員更好地理解腫瘤的行為，并測(cè)試潛在治療方案的有效性。?；锶四X膠質(zhì)瘤類(lèi)器官培養(yǎng)基套裝（Human Glioblastoma Organoid Kit）是一種化學(xué)定義的細(xì)胞培養(yǎng)基，用于建立高度仿真、操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定的人腦膠質(zhì)瘤組織來(lái)源的類(lèi)器官模型

2、 產(chǎn)品信息

3、 其他自備材料和試劑

4、 人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官培養(yǎng)基的制備

1、   收到人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基后，將培養(yǎng)基置于四度冰箱進(jìn)行解凍；

2、   將解凍后培養(yǎng)基上下顛倒充分混勻，在無(wú)菌的生物安全柜或超凈工作臺(tái)中將培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，推薦分裝成10mL規(guī)格；

3、   將分裝后的培養(yǎng)基儲(chǔ)存于-20℃，使用時(shí)拿出分裝后的培養(yǎng)基解凍。

5、 原代人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官的建立與傳代培養(yǎng)

注意：涉及主要人體組織材料的研究必須遵循所有相關(guān)的機(jī)構(gòu)和政府法規(guī)。在收集主要人體組織材料之前，必須獲得所有受試者的知情同意。

a)     原代人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官的建立

1、   在?；锘罱M織保存液中收集原代人腦膠質(zhì)瘤組織。

2、   將組織放入小皿中，用含有1%雙抗的預(yù)冷DPBS清洗兩次組織。

3、   在含有1%雙抗的DPBS中使用外科剪刀或?qū)⒔M織壞死部分剔除，留下透明的膠質(zhì)瘤組織并剪切成1mm的小塊（切勿撕扯）。

4、   去除碎片：用模基生物類(lèi)器官防粘附潤(rùn)洗液潤(rùn)洗過(guò)的寬口槍頭組織混懸液轉(zhuǎn)移入潤(rùn)洗過(guò)的10mL離心管中靜置，約5min后碎片沉底，吸走上清。

5、   裂解紅細(xì)胞：在組織塊沉淀中加入3-5mL紅細(xì)胞裂解液在搖床上震蕩5min，加入5mL模基生物上皮類(lèi)器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基靜置5min后，棄去上清。

6、   在組織塊沉淀中加入人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基，混懸后用潤(rùn)洗過(guò)的寬口槍頭將混懸液接種到超低粘附六孔板中，每孔15-25個(gè)膠質(zhì)瘤塊，接種完成后加入人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官培養(yǎng)因子B。

7、   將接種完成后的培養(yǎng)板放入37℃二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中，靜置1小時(shí)，靜置結(jié)束后置于水平搖床上搖晃80rpm孵育，以促進(jìn)類(lèi)器官的形成，便于增加營(yíng)養(yǎng)和氧氣的擴(kuò)散。

8、   每隔兩天換一次液。周會(huì)脫落很多細(xì)胞，培養(yǎng)基容易渾濁

注意：換液時(shí)可45°傾斜培養(yǎng)板，用潤(rùn)洗過(guò)的寬口槍口吸走培養(yǎng)基上清。

9、   腫瘤塊一般在10-30天形成膠質(zhì)瘤類(lèi)器官。

b)      人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官的傳代培養(yǎng)

1、   用精細(xì)解剖剪和鑷子將類(lèi)器官剪為直徑約0.5mm的小塊進(jìn)行繁殖，以避免類(lèi)器官內(nèi)核缺氧死亡。

2、   剪過(guò)的組織塊轉(zhuǎn)移在超低粘附六孔板中加入人腦膠質(zhì)瘤類(lèi)器官培養(yǎng)基，將接種完成后的培養(yǎng)板放入37℃二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中，置于水平搖床上80rpm搖晃孵育。

V2.0版

更新時(shí)間：2025/6/21