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Tissue Digestion Solution
? 配制后的正常可在2-8°C儲存,建議24小時內(nèi)使用,或-20℃儲存1個月
產(chǎn)品描述
?;镎=M織消化液(Tissue Digestion Solution)可將正常組織樣本溫和、快速地消化解離為細胞懸液或細胞團塊,可用于后續(xù)類器官的構(gòu)建。該廣泛適用于哺乳動物的多種正常組織標(biāo)本(如腸、肝臟、肺臟、胃、胰腺等)在體外原代培養(yǎng)的消化解離。
產(chǎn)品信息
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正常 | MB-0818L06L | MG6011-TDS-A500 | 2-8°C | 24個月 | ||
正常添加劑(20×) | 25mL | MG6011-TDS-B500 | -20°C | |||
MB-0818L06S | MG6011-TDS-A100 | |||||
正常添加劑(20×) | 5mL | MG6011-TDS-B100 |
的配制
1、 4°無菌條件下配制正常,下面是配制10mL的示例,如果需要制備其他體積,可自行相應(yīng)調(diào)整。
2、 4℃解凍正常添加劑(20×),解凍后充分混勻;
注意:解凍后,建議將正常添加劑分裝后保存,按需取用,避免多次反復(fù)凍融;
3、 將500uL正常添加劑(20×)加至9.5mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混合,配制成10mL。
注意:配制后的正??稍?span>2-8°C儲存,建議24小時內(nèi)使用,或-20℃儲存1個月。
組織樣本的消化
1、 在消化之前利用或?qū)⑶谐审w積約為1~3mm3的碎片;
2、 根據(jù)原組織塊大小加入適當(dāng)體積的(消化液體積需是原組織體積的25-50倍)后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱或37°C恒溫?fù)u床中進行組織消化。不同種類組織的樣本,因其組織來源及個體化差異,其消化所需時間可能會有所不同,總體消化時間在30min-120min;
注意:在此操作過程中須仔細監(jiān)測消化過程,因為過度消化可能會顯著降低類器官形成效率。消化過程中,可以對消化懸液進行鏡檢,在鏡下觀察到較多的單個細胞或70μm以下的細胞簇后,即可認(rèn)為消化完成;
3、 在確認(rèn)消化完成的組織懸液中加入胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)至終濃度達2-5%后吹打混合均勻以終止消化;
4、 上述步驟所獲得細胞懸液可直接用于離心或篩網(wǎng)過濾后進行離心,獲取細胞團塊,在使用分離的細胞前需利用類器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基對樣本進行兩次以上的離心清洗方可使用(推薦離心速度200-300g,離心3min)。
V2.0版
更新時間:2025/6/21