NeuroPrime Cerebral Keeper Kit

NeruoPrime series 腦類(lèi)器官長(zhǎng)期培養(yǎng)試劑盒

? 產(chǎn)品是無(wú)菌的，產(chǎn)品外包裝是非無(wú)菌的，請(qǐng)?jiān)谑褂们皩?duì)產(chǎn)品外包裝充分消毒。

? 產(chǎn)品一經(jīng)拆封，應(yīng)妥善存放以確保產(chǎn)品的無(wú)菌性。

1、 產(chǎn)品描述

NeuroPrime Cerebral Keeper Kit通過(guò)對(duì)Neurobasal Media體系進(jìn)行系統(tǒng)性組分調(diào)整與濃度優(yōu)化，顯著提升其對(duì)人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）源性三維類(lèi)腦器官培養(yǎng)的適配性。該體系通過(guò)精確調(diào)控滲透壓（290±5 mOsm/kg）維持細(xì)胞體積穩(wěn)態(tài)，整合改良型神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子組合（梯度遞送系統(tǒng)）協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)元分化成熟與突觸網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。針對(duì)類(lèi)腦器官發(fā)育后期常見(jiàn)的氧化應(yīng)激及中心壞死現(xiàn)象，創(chuàng)新性引入/N-乙酰半/輔酶Q10三元抗氧化復(fù)合體系，通過(guò)清除ROS/RNS自由基并激活Nrf2-ARE通路增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化能力。特別添加的環(huán)甘酸多聚化合物（cAMP/cGMP類(lèi)似物）可靶向調(diào)控PI3K/Akt及Bcl-2家族蛋白表達(dá)，有效抑制因器官體積膨脹引發(fā)的caspase-3依賴性凋亡通路。該體系通過(guò)ALL-in基礎(chǔ)培養(yǎng)基配合2×O27神經(jīng)元特異性補(bǔ)充劑及1×N2 PLUS實(shí)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞增殖與分化平衡，為類(lèi)腦器官的長(zhǎng)時(shí)程培養(yǎng)（>90天）提供精準(zhǔn)的微環(huán)境支持。

2、 產(chǎn)品信息

3、 其他自備材料和試劑

4、 ?；锿扑]用細(xì)胞系

H1、H9、HN4、iPSCs帕金森患者來(lái)源DY043、iPSC-EGFP等

5、 新手須知

注意事項(xiàng)：在使用時(shí)應(yīng)始終穿戴，在處理諸如人體細(xì)胞或其他生物及有害物質(zhì)時(shí)應(yīng)遵循安全的實(shí)驗(yàn)室規(guī)程。

僅用于科學(xué)研究。

6、 腦類(lèi)器官成熟與長(zhǎng)期維持實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范（Maturation & Maintenance）

a)      形態(tài)學(xué)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)EBs直徑達(dá)到1.0-1.2 mm時(shí)，通過(guò)明場(chǎng)顯微鏡觀察其結(jié)構(gòu)特征：中心呈現(xiàn)致密神經(jīng)上皮團(tuán)塊（Dense neuroepithelial core，SOX2+/PAX6+標(biāo)志陽(yáng)性）外周形成疏松的放射狀神經(jīng)外胚層結(jié)構(gòu)（Radial polarized layer，N-Cadherin+/ZO-1+）確認(rèn)上述特征后，視為進(jìn)入腦成熟階段（Neural maturation phase）

b)     機(jī)械剝離操作流程

無(wú)菌條件下，將EBs轉(zhuǎn)移至預(yù)冷（4°C）的DPBS中靜置5分鐘以降低膠體黏附性。使用27G（針頭斜口朝外），沿EBs外周膠質(zhì)層（GFAP+區(qū)域）進(jìn)行精細(xì)環(huán)形切割，逐步剝離外層纖維化基質(zhì)。清除后立即將EBs轉(zhuǎn)移至含3 mL NeuroPrime Cerebral Keeper Kit的6孔超低吸附板中。

c)      動(dòng)力學(xué)調(diào)整策略

搖床轉(zhuǎn)速提升至120 rpm，通過(guò)增強(qiáng)流體剪切力促進(jìn)培養(yǎng)基-組織界面物質(zhì)交換，降低中心缺氧區(qū)面積。換液頻率調(diào)整為每3日全量換液，避免代謝副產(chǎn)物積累

V1.1版

更新時(shí)間：2025/06/23