類器官用基質(zhì)膠在4°C條件下為液態(tài),但在加熱到37°C時呈凝膠狀態(tài)。基質(zhì)膠凝固后,重新放回4°C過 夜,基質(zhì)膠可再次液化。(小提示:基質(zhì)膠液化,建議將基質(zhì)膠放4°C 冰箱的冰盒里,保持溫度穩(wěn)定,基質(zhì)膠液化完)。適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學(xué)研究,體內(nèi)和體外血管生成實驗和免疫缺陷小鼠成瘤實驗。
類器官(organoids)是一種利用具有干性潛能的細(xì)胞體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物。由于與對應(yīng)的器官擁有高度相似的組織學(xué)特征,具有自我更新和自我組織能力,并能重現(xiàn)該器官的部分生理功能,因此類器官可作為多種疾病的體外模型,在干細(xì)胞與發(fā)育、再生醫(yī)學(xué)、疾病研究、藥物開發(fā)和精準(zhǔn)醫(yī)療等多個方面擁有廣泛的應(yīng)用前景。類器官在體外培養(yǎng)時,由于周期較長,培養(yǎng)過程中注意事項較多,操作較為繁瑣,在操作過程中難免會遇到些許"疑難雜癥"導(dǎo)致實驗失敗。
如何選擇構(gòu)建類器官的來源細(xì)胞?
答:理論上所有類器官都可以選擇從ESC/IPSC來構(gòu)建,部分類器官可以選擇從組織中分離成體干細(xì)胞來構(gòu)建,成體干細(xì)胞來源的類器官其構(gòu)建周期短,體外傳代次數(shù)多,相對而言構(gòu)建成本低;根據(jù)實驗需求,如果要通過類器官模型來研究器官的發(fā)育,需要對起始細(xì)胞進(jìn)行基因編輯,一般都是通過ESC/IPSC來構(gòu)建類器官。
注意事項:
類器官用基質(zhì)膠在溫度高于10°C時就會開始凝固成膠,所以盡量在冰上操作基質(zhì)膠。類器官 傳代時,如果為了避免酶對類器官造成影響,可直接用4°C預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基對基質(zhì) 膠進(jìn)行緩慢吹打,即可將類器官從基質(zhì)膠中釋放出來。