低濃度基質(zhì)膠是通過基因編輯技術(shù)將多種表達(dá)膠原蛋白的基因序列插入到經(jīng)永生化處理的小鼠子宮肌瘤細(xì)胞系中,并在實(shí)體腫瘤中抽提出來。其主要成分有層粘連蛋白、IV型膠原、巢蛋白、硫酸酐素糖蛋白,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
一、基質(zhì)膠用途?
1、Matrigel有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化;
2、可用于對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵染和基因表達(dá)等的研究;
3、提高人腫瘤細(xì)胞在裸鼠上的生長速度;
4、建立評(píng)估腫瘤細(xì)胞侵襲能力的模型。
基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。
二、低濃度基質(zhì)膠特征:
敏感性:對(duì)溫度十分敏感;
成膠性:在常溫下快速形成膠狀物;
三維結(jié)構(gòu):可聚合形成具有生物活性的三維膠質(zhì)結(jié)構(gòu);
顏色變化:具有有色差變化(淡黃色到深紅色);
用途廣:可模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能;
適用性強(qiáng):細(xì)胞可在0.5mm-1mm厚度的基質(zhì)層表面生長。
三、薄膠成膠方法:
1、凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2、將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigenge|基質(zhì)。
3、在37°C放置30分鐘,即可使用。