很多人不知道ABW基質(zhì)膠是什么,下面跟著小編一起去看看,它通過基因編輯技術(shù)將多種表達(dá)膠原蛋白的基因序列插入到經(jīng)永生化處理的小鼠子宮肌瘤細(xì)胞系中,并在實(shí)體腫瘤中抽提出來的。其主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
那又是基質(zhì)膠什么呢?
它是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出基底膜基質(zhì),其主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
下面我們?nèi)タ纯碅BW基質(zhì)膠成瘤實(shí)驗對比,具體內(nèi)容如下:
一、實(shí)驗材料
細(xì)胞:B16-F10
培養(yǎng)基:含10%FBS的*培養(yǎng)基
耗材:預(yù)冷槍頭、預(yù)冷離心管
其他:胰酶,PBS,Matrigengel(ABW貨號:批次a和批次b兩個批次)
二、實(shí)驗步驟
A.準(zhǔn)備基質(zhì)膠
1.4℃解凍Matrigengel,實(shí)驗前轉(zhuǎn)移到冰盒中。(注意:同樣要準(zhǔn)備一些4℃預(yù)冷的槍頭用于吸取Matrigengel)
B.制作細(xì)胞懸液
取對數(shù)生長期的細(xì)胞,經(jīng)消化、離心、計數(shù)后,用無血清培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。分別按1:3和1:6的比例稀釋C品牌、批次a和批次b三種基質(zhì)膠,并最終調(diào)整細(xì)胞密度至1×107個/mL。
C.皮下接種細(xì)胞
1.選取6-8周C57BL/6的雌性小鼠18只,每組3只。
2.分別在小鼠后背左右兩側(cè)腋下接種1×106個細(xì)胞。
3.在SPF級屏障環(huán)境的條件下飼養(yǎng)14天。
D.結(jié)果統(tǒng)計
14天后取出腫瘤,稱取重量。