高濃度ABW基質(zhì)膠是通過(guò)基因編輯技術(shù)將多種表達(dá)膠原蛋白的基因序列插入到經(jīng)永生化處理的小鼠子宮肌瘤細(xì)胞系中,并在實(shí)體腫瘤中抽提出來(lái)。其主要成分有層粘連蛋白、IV型膠原、巢蛋白、硫酸酐素糖蛋白,還包含生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等??蓪?shí)現(xiàn)進(jìn)口品牌基質(zhì)膠的國(guó)產(chǎn)替代。
1、高濃度ABW基質(zhì)膠的使用
?、倩|(zhì)膠顏色的變化可能發(fā)生在冷凍或解凍ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)藥瓶的過(guò)程中,由于二氧化碳與重碳酸鹽緩沖液和酚紅的相互作用,顏色會(huì)從淡黃色變化到深紅色。顏色的變化是正常的,②不影響產(chǎn)品功效,在與5%的二氧化碳平衡后顏色將消失。
在冰上4°C解凍ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)。一旦解凍,旋轉(zhuǎn)藥瓶以確保材料均勻分散。向藥瓶的頂端噴灑70%乙醇,并在空氣中干燥。將產(chǎn)品放置在冰上,處理時(shí)請(qǐng)使用無(wú)菌操作。利用預(yù)冷的移液管、吸頭和管分裝材料,并立即冷凍。避免反復(fù)凍融。
2、預(yù)防措施
ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)在22°C到35°C將快速凝膠化。請(qǐng)?jiān)诒?°C過(guò)夜解凍。在使用前請(qǐng)將產(chǎn)品放置在冰上,當(dāng)準(zhǔn)備使用ABW基質(zhì)膠時(shí),請(qǐng)預(yù)冷移液管、吸頭和管。
3、包被程序
注意:一旦凝膠化,ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)應(yīng)該被立即使用。我們推薦至少6mg/mL蛋白濃度的ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)。ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)的濃度是批次特異的,并且以分析證明書為基礎(chǔ)。您可以預(yù)先檢查基質(zhì)的批次,通過(guò)聯(lián)系A(chǔ)BW來(lái)預(yù)定適合您蛋白濃度的特定批次的ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)。
按推薦的方法解凍ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管,均勻的混合。
將24孔細(xì)胞培養(yǎng)板放置在冰上,向每個(gè)孔中加入0.289mL冷凍的ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)(10mg/mL)。該量對(duì)于覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面應(yīng)該是足夠的。如果ABW®Matrigengel基底膜基質(zhì)需要稀釋到10mg/mL,請(qǐng)使用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋。
在移液管吸取液體加入到每個(gè)孔中時(shí),請(qǐng)避免氣泡。如果孔中含有氣泡,請(qǐng)?jiān)?°C預(yù)冷的離心機(jī)中將培養(yǎng)板離心300xg,10分鐘。