ABW基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的小鼠腫瘤細(xì)胞中提取出基底膜基質(zhì)，其主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白，還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。在室溫條件下，Matrigengel聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化，可用于對細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵染和基因表達(dá)等的研究。
類器官是一個在Matrigengel的支撐下形成三維“微器官模型”，可以模擬天然器官的結(jié)構(gòu)和功能。與傳統(tǒng)的二維培養(yǎng)模型相比，類器官可以模擬出整個生物體的生理過程，具有更接近體內(nèi)細(xì)胞組成和行為，基因組更穩(wěn)定，更適合生物轉(zhuǎn)染和高通量篩選的優(yōu)點(diǎn)。與動物模型相比，類器官模型的操作不僅更簡單，而且快速成型，兩到三周即可得到所需數(shù)據(jù)。
一、實(shí)驗(yàn)材料：
細(xì)胞：病人腫瘤細(xì)胞
培養(yǎng)基：F12K/DMEM培養(yǎng)基，PDO培養(yǎng)基
耗材：預(yù)冷槍頭、預(yù)熱24孔板、預(yù)冷0.5ml離心管
其它：Matrigengel（ABW貨號0827035）
二、實(shí)驗(yàn)步驟：
A.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1.提前24h將Matrigengel放置于4°冰箱慢慢融化，(為避免反復(fù)凍融，收到貨以后分裝成小規(guī)格保存，于-20°保存)
2.需要提前制冰。
B.細(xì)胞獲?。簭尼t(yī)院將病人的腫瘤組織，快速按照獲取原代細(xì)胞的方法操作，獲得腫瘤細(xì)胞。
C.細(xì)胞種板：
1.按每孔5000個細(xì)胞稀釋，將細(xì)胞懸液放置在冰上，按照比例加入Matrigengel，混合均勻，將混合液滴入10ul-20ul到24孔板底部，每孔約3-4滴。
2.將培養(yǎng)板放入37°培養(yǎng)箱中，孵育30min，待Matrigengel凝固。
3.準(zhǔn)備所需量PDO培養(yǎng)基，放入37°水浴鍋預(yù)熱。
4.膠滴凝固以后，每孔加入500ul培養(yǎng)基。
5.將培養(yǎng)板放會培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
6.每隔兩天采集圖像記錄。
更新時間：2022-06-07 
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